微生物檢測的檢驗方法小結

    微生物檢測方法一：沉降法

    將盛有培養基的平皿放在空氣中暴露一定時間，經培養后計算出其上所生長的菌落數。此法簡單，使用普遍，由于只有一定大小的顆粒在一定時間內才能降到培養基上，因此，所測得微生物數量欠準確，檢驗結果比實際存在數量少，并且也無法測定空氣質量，所以，僅能粗略計算空氣污染及了解被測趣味生物的種類。

    【檢驗方法】

    （1）將一直被好的營養瓊脂、查氏培養基及高氏1號三種平板置于待測地點，打開皿蓋在空氣中暴露5~10min。

    （2）蓋上培養皿蓋，置于℃培養24~45h，根據平板上所生長的菌落數計算出1m?或1L空氣中的細菌總數。

    （3）計算，奧梅梁斯基認為：在面積為100cm2平板瓊脂培養基表面上，5min降落的細菌數經37℃培養24h后生長的菌落數和10L空氣中所含的細菌數相當。根據奧氏公式計算

    式中X—每1m?空氣中的細菌個數；

    式中N—5min降落在平板上，經37℃培養24h后生長的菌落數；

    式中r—平皿底半徑。

    經測定發現，用奧氏公式計算的浮游細菌數比實測的浮游細菌少。原因是此公式沒有考慮塵埃粒子大小、數量、氣流情況、人員密度和活動情況。

    微生物檢測方法二：撞擊法

    以縫隙采樣器為例，用吸風機或真空泵江含菌空氣以一定流速穿過狹縫而被抽吸到營養瓊脂培養及平板上。狹縫長度為平皿的半徑，平板與縫的間隙有2㎜，平板以一定的轉速旋轉。通常平板轉動一周，取出置于37℃恒溫箱中培養的48h，根據空氣中微生物的密度可調節平板狀動的速度。采集含菌高的空氣樣品時，平板轉動的速度要比含菌zui低的空氣樣品的轉速快。根據取樣時間和空氣流量算出單位空氣中的含菌量。采樣器的規格各國不一，可按說明書操作。

    微生物檢測方法三：過濾法

    該法是抽取定量空氣通過一種液體吸收劑，然后取此液體定量培養計數出菌落數。

    （1）將無菌的液體培養基或無菌水與真空泵相連，以每分鐘10L速度取空氣樣并劇烈震蕩，使阻流在液體中的氣溶膠或微生物均勻分散。

    （2）吸取上述含菌液體吸收液1mL與融化冰冷卻到45℃左右的營養液瓊脂做傾注培養，同時做三個平行試驗，置37℃恒溫箱中培養48h，計算平均菌落數。根據下列公式計算

    式中X—每1m?空氣中的細菌數；

    式中Vs—吸收液體量，mL；

    式中Va—空氣過濾量，L；

    式中N—每1mL液體培養基中的細菌數。

    微生物檢測方法四：簡易定量測定法

    用無菌注射器定量抽取空氣，將所取空氣壓入培養基內部，經培養后，即可定量、定性測定空氣中微生物，此法簡單易行。

    （1）將無菌固體培養基融化后，在50℃水浴中保溫備用。

    （2）利用50~100mL無菌注射器抽取待測環境空氣20~100mL。

    （3）在無菌操作下，取已融化培養基倒入無菌平皿中，平皿稍作傾斜，將注射器插入培養基深處，緩慢將空氣壓入培養基內，輕輕搖勻以消除氣泡。待培養基凝固，置于30℃恒溫箱中培養3d后統計菌落數量，推算1L空氣所含菌量。通過菌落形態定性微生物，如統計霉菌數量時培養的時間稍許延長。應用此法需多做平行試驗，求其平均值以提高準確性。